347 ryðfríu stáli efnasamsetning Stærð bláæða- eða háræðablóðs, sértæk fyrir SARS-CoV-2, T-frumuviðbrögð ákvarðar ónæmi gegn COVID-19.

Þakka þér fyrir að heimsækja Nature.com.Þú ert að nota vafraútgáfu með takmarkaðan CSS stuðning.Til að fá bestu upplifunina mælum við með því að þú notir uppfærðan vafra (eða slökkva á eindrægnistillingu í Internet Explorer).Að auki, til að tryggja áframhaldandi stuðning, sýnum við síðuna án stíla og JavaScript.
Rennistikur sem sýna þrjár greinar á hverri glæru.Notaðu til baka og næsta hnappa til að fara í gegnum glærurnar, eða rennibrautarhnappana í lokin til að fara í gegnum hverja glæru.

347 ryðfríu stáli efnasamsetning

Ryðfrítt stál 347 spólu rör efnasamsetning

Efnasamsetning og vélrænni eiginleikar ryðfríu stáli 347 spólurörsins eru sem hér segir:
- Kolefni – 0,030% hámark
- Króm – 17-19%
- Nikkel - 8-10,5%
- Mangan - 1% hámark

Vélrænir eiginleikar ryðfríu stáli 347 spólurör

Samkvæmt ryðfríu stáli 347 spólurör framleiðanda, vélrænni eiginleikar 347 spólurör:
- Togstyrkur (psi) – 75.000 mín
- Afrakstursstyrkur (psi) – 30.000 mín
- Lenging (% í 2″) – 25% mín
- Brinell hörku (BHN) – 170 max

Notkun og notkun ryðfríu stáli 347 spólurör

• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í sykurmyllur.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í áburð.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í iðnaði.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í orkuverum.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í matvæli og mjólkurvörur.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör notað í olíu- og gasverksmiðju.
• Ryðfrítt stál 347 spólurör framleiðandi notaður í skipasmíðaiðnaði.

SARS-CoV-2 sértækar T-frumur eru taldar vernda gegn sýkingu og framgangi COVID-19, en það eru engar beinar vísbendingar um það.Hér bárum við saman heilblóðsmælingar á SARS-CoV-2-sértækum interferon-γ jákvæðum T-frumum við jákvæðar niðurstöður COVID-19 greiningarprófa (PCR og/eða hliðflæði) innan 6 mánaða frá blóðsöfnun Lian.Meðal 148 þátttakenda sem gáfu bláæðablóðsýni var umfang SARS-CoV-2 sértækrar T-frumu svörunar marktækt hærra hjá þeim sem héldust verndaðir en hjá þeim sem voru sýktir (P < 0,0001).% hættu á sýkingu, en mikil styrkleiki minnkaði þessa hættu í 5,4%.Þessar niðurstöður voru alhæfðar á 299 þátttakendur til viðbótar sem prófuðu stigstærð háræðablóðpróf sem gæti auðveldað aðgang að þýðismæla T-frumu ónæmisgögnum (14,9% á móti 4,4%).Þannig getur mæling á T-frumum sem eru sértækar fyrir SARS-CoV-2 spáð fyrir um hættu á sýkingu og ætti að meta þær þegar fylgst er með ónæmisstöðu einstaklings og íbúa.
Að mæla og skilja ónæmissvörun við SARS-CoV-2 sýkingu er mikilvægt til að þróa árangursríkar framtíðaráætlanir til að lágmarka lýðheilsu og efnahagsleg áhrif framtíðar COVID-19 faraldra.Að bera kennsl á ónæmisfylgni mun veita mikilvægar upplýsingar um næmni íbúa fyrir veirusýkingu, hugsanlega snemma viðvörun um hámarks sjúkrahúsinnlagnir, og einnig gera fólki kleift að stjórna sýkingarhættu sinni og hættu á að smita aðra persónulega.Ónæmiseftirlit hefur reynst mikilvægt til að meta virkni COVID-19 bóluefna hjá heilbrigðum og áhættusjúklingum1,2,3, sérstaklega í SARS-CoV-24 stökkbreyttum, og uppgötvun ónæmisbældra mun þýða þörfina á að auka ónæmi Bólusetja sig og koma í veg fyrir komandi uppkomu.
Ónæmi einstaklings fyrir SARS-CoV-2 sýkingu veltur á mörgum þáttum: veiruálagi við útsetningu, veiruafbrigðum, aldri, fyrri bólusetningu/sýkingarstöðu, fylgisjúkdómum, lyfjum og síðast en ekki síst, and-SARS-CoV sýkingu. .2 aðlögunarhæft ónæmissvörun á sér stað við útsetningu fyrir veirunni5.Mat á ónæmissvörun við SARS-CoV-2 sýkingu og/eða bólusetningu hefur einblínt á sermisfræðilegar prófanir sem mæla tilvist mótefna sem eru sértæk fyrir byggingarprótein (td topp glýkóprótein).Hins vegar, tilvist eða fjarvera mótefna eitt og sér ákvarðar ekki nákvæmlega verndandi ónæmissvörun, þar sem svörun minnkar verulega með tímanum6 og hlutleysing á SARS-CoV-2 afbrigðum í bata eða tvíbólusettum einstaklingum Veik virkni, sem gæti leitt til mikillar fjöldi gegnumbrotssýkinga7.Reyndar minnkaði vörn gegn einkennum COVID-19 af völdum Omicron afbrigðisins (B.1.1.529) í um 10% eftir aðeins 4-6 mánaða mRNA bólusetningu, þó að vernd gegn alvarlegum sjúkdómi héldi >68% í að minnsta kosti 7 mánuði8.Mæling á aðlagandi T-frumuviðbrögðum í minni, sem veita langtímavörn gegn veirusýkingu, er besta vísbendingin um næmi fyrir SARS-CoV-2 sýkingu og því betri vísbending um hættuna á að prófa jákvætt fyrir COVID-199, þar sem sértækt T frumur geta komið í veg fyrir sýkingu.án sermisbreytingar10,11.Hins vegar hefur mæling á svörun T-frumna fengið minni athygli vegna aðferðafræðilegra erfiðleika og skipulagslegra vandamála við að fá og flytja bláæðablóðsýni, sérstaklega þegar gerðar eru stórar athugunarrannsóknir til að meta virkni bóluefnisins og fylgjast með ónæmi.Hins vegar sýna bólusettir einstaklingar öfluga T-frumuvirkni gegn SARS-CoV-2 afbrigðum, sem hugsanlega vega upp á móti tapi á mótefnaviðbrögðum til að takmarka alvarleika COVID-1912,13.
Hér var leitast við að skilja hvort ein mæling á SARS-CoV-2 T frumusvörun gæti sagt fyrir um algera hættu á SARS-CoV-2 sýkingu innan 6 mánaða frá blóðsýnatöku, óháð fyrri ónæmisáhrifaþáttum.Til þess að gera T-frumuprófið háa afköst og eiga við stærri rannsóknir, reyndum við einnig að gera prófið smækkað þannig að hægt væri að framkvæma það með háræðsfingurstikablóðsýni.
Við mældum frumu- og húmorónæmissvörun hjá heilbrigðum gjöfum með því að nota samsetta greiningu á SARS-CoV-2 T-frumum og IgG mótefnum byggt á bláæðablóði (fyrir einkenni þátttakenda, sjá mars 2022 14. Hjá bólusettum gjöfum, SARS-CoV-2- sérstök T-frumuviðbrögð voru ákvörðuð með því að mæla plasma interferon-γ (IFN-γ) gildi í kjölfar heilblóðsörvunar með SARS-CoV-2 peptíði (eins og áður, tilvísanir 14,15,16,17,18) og IgG svörun tengd. með núkleókapsíði (N) voru aukin hjá þeim sem tilkynntu um fyrri sýkingu, þó bæði svörunin hafi verið hærri hjá áður sýktum óbólusettum gjöfum, hámarks í líkamanum (Mynd 1a,b).IgG svörun gegn topp glýkópróteinum (RBD, S1, S2) voru hæstir hjá áður sýktum bólusettum gjöfum (mynd 1c–e).
SARS-CoV-2-sértæk IFN-γ+ T-frumuviðbrögð voru mæld með heilblóðsprófi og byggð á bólusetningum þátttakenda og fyrri SARS-CoV-2 sýkingarstöðu (staðfest með PCR og/eða hliðflæðisprófi)' Vac + /Inf +' n = 60 (grænt), 'Vac + /Inf-' n = 82 (blátt), 'Vac-/Inf +' n = 4 (gult), 'Vac-/Inf-' n = 1 (ekki beitt).SARS-CoV-2-sértæk IgG bindiviðbrögð miða að kjarnakapsíði („N“) (b; ****P < 0,0001, **P = 0,0016), viðtakabindandi léni („RBD“) (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), toppundireining 1 ("S1") (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) og hámarks undireining 2 ("S2") (e) var mæld með blóðprufum í bláæðum og byggt á bólusetningu þátttakenda og fyrri SARS -CoV-2 (staðfest með PCR og/ eða hliðflæðispróf) smitandi ástand.'Vac + /Inf +' n = 60 (grænt), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (blátt), 'Vac-/Inf +' n = 4 (gult).Samanburður var gerður með Kruskal-Wallis prófinu, leiðrétt fyrir margvíslegan samanburð með Dunn prófinu.Gögnin eru sýnd sem töflur (miðlína við miðgildi, efri mörk við 75. hundraðshluta, neðri mörk við 25. hundraðshluti) með hársvörð við lágmarks- og hámarksgildi.Hver punktur táknar gjafa.Hrágögn eru veitt í formi hrágagnaskráa.
Eftir blóðsýnatöku voru þátttakendur beðnir um að tilkynna sjálfir um jákvæðar niðurstöður PCR og/eða hliðflæðisprófa fyrir COVID-19;ef þátttakendur reyndust jákvæðir á milli 1. september 2021 og 29. desember 2021, var talið að þeir væru sýktir af Delta (B.1.617.2) afbrigði kransæðaveiru og Omicron (B.1.1.529) til Public Health Wales eftir 29. desember 2021, þegar þessi valkostur umhyggju verður ráðandi.Af 148 metnum gjöfum sáum við sýkingartíðni upp á 26,3% (39/148) innan 6 mánaða frá blóðgjöf, 38 þeirra fengu annan eða þriðja skammt af COVID-19 bóluefninu (sýkingarbyltingin átti sér stað eftir Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) mRNA bóluefni eða AstraZeneca bóluefni (ChAdOx1 nCoV-19));óbólusettur gjafa var einnig sýktur.Umfang SARS-CoV-2 sértækra IFN-γ-jákvæðra T-frumuviðbragða var marktækt lægri hjá þeim sem tilkynntu um jákvætt greiningarpróf fyrir COVID-19 en hjá ósýktum gjöfum (P < 0,0001; mynd 2a), aðallega vegna ákjósanlegur örvun T-frumuviðbragða með bólusetningu hjá sumum þátttakendum (P = 0,050; viðbótarmynd 1).Engin fylgni var á milli umfangs IFN-γ+ T frumusvörunar og tíma þess að jákvæðri niðurstöðu COVID-19 prófs (aukamynd 2).Aftur á móti voru hvorki RBD-, S1-, S2-bindandi IgG svör (myndir 2b-d) né RBD-, S1 hlutleysandi mótefnasvörun sértæk fyrir villigerð eða delta SARS-CoV-2 (B.1.617).) (aukamynd 3) getur greint á milli fólks sem er í hættu á sýkingu.Hins vegar hafði lág N-tengd IgG svörun gegn SARS-CoV-2 fylgni við hættuna á COVID-19 sýkingu (P = 0,0084; mynd 2e);þeir sem reyndust jákvæðir voru 85% ólíklegri (P = 0,00035; EÐA 0,15, 95).% CI: 0,047–0,39 (viðbótarmynd 4).
Blóðsýni úr bláæðum frá heilbrigðum gjöfum (n = 148) mátu SARS-CoV-2-sértæk IFN-γ+ T-frumu svörun (a; ****P < 0,0001) og bindingu Spike viðtakans við sértæka SARS-CoV -2 áreiti.lén („RBD“) (b), topp 1 undireining („S1″) (c), topp 2 undireining (“S2″) (d), og núkleókapsíð („N“) (e; **P = 0,0084) .Þátttakendur sem reyndust jákvæðir fyrir COVID-19 (PCR og/eða hliðarflæði) greindu;allar sýkingar komu fram innan 6 mánaða frá blóðsýni.Samanburður var gerður með því að nota tvíhliða Mann-Whitney próf.Gögnin eru sýnd sem töflur (miðlína við miðgildi, efri mörk við 75. hundraðshluta, neðri mörk við 25. hundraðshluti) með hársvörð við lágmarks- og hámarksgildi.Hver punktur táknar gjafa.ns er ekki mikilvægt.Hitakortið f sýnir Spearman's rank fylgni milli breyta fyrir tilgreint gagnasafn.Samanburður sem var ekki tölfræðilega marktækur var útilokaður úr fylkinu og merktur með auðum reitum.Hrágögn eru veitt í formi hrágagnaskráa.
Forstillta jákvæða greiningarmörkin upp á 14 var talin of handahófskennd til að meta hættuna á endursýkingu, þannig að millifjórðungsbil var komið á til að ákvarða alger áhættubreytur.Tölfræðilíkanið, sem aðeins innihélt breytur sem höfðu marktæk áhrif á niðurstöðurnar, sýndi að umfang SARS-CoV-2-sértæku IFN-γ+ T frumusvars var mikilvægasti ónæmislífmerkið til að ákvarða möguleika einstaklings á að vera prófaður fyrir COVID.-19 jákvæð (Mynd 2f og viðbótarmynd 4).Sjúklingar með SARS-CoV-2 sértæka IFN-γ+ T frumusvörun í þriðja (194-489 pg/ml IFN-γ) og fjórða (>489 pg/ml IFN-γ) fjórðungshluta 65% (P = 0,055; OR 0,35, 95% CI: 0,11–1,00) og 90% (P = 0,0050; OR 0,098, 95% CI: 0,014–0,42) voru með fleiri þátttakendur.Líkurnar eru litlar (aukamynd. 4).Í heildina voru þátttakendur með SARS-CoV-2 sértæka T-frumu svörun úr bláæðablóði ≤79 pg/ml IFN-γ 43,2% hættu á gegnumbrotssýkingu eftir 6 mánuði, samanborið við svörun >489 pg/ml.ml af IFN-γ var með 5,4% smithættu (tafla 2).
Bláæðapróf í heilblóði er takmarkað að umfangi vegna þess að sýnisöfnun þarf hjá bláæðalækni.Til að auka framboð á T-frumum og IgG prófum fyrir SARS-CoV-2 hefur önnur háræðablóðsýnisaðferð verið þróuð til að gera þátttakendum kleift að fá fingurstiku blóðsýni heima.Eftir því sem við best vitum hafa engar fyrri skýrslur verið til um mælingar á mótefnavaka-sértækri starfsemi T-frumna í háræðablóðsýnum.Áður hefur verið sýnt fram á sterk fylgni á milli eitilfrumnafjölda sem fæst með sambærilegum háræða- og bláæðablóðsýnum.Að auki hefur verið greint frá því að mælingar sem byggja á heilblóði sem mæla SARS-CoV-2-sértæk T-frumuviðbrögð nota aðeins 320 μL af bláæðablóði,20 sem útilokar áhyggjur af tíðni T-forfrumna í háræðablóðsýnum.
Við notuðum þessa afkastamiklu stöðluðu samvinnugreiningu á SARS-CoV-2 T-frumum og IgG mótefnum byggt á háræða heilblóði til að mæla frumu- og húmorónæmissvörun hjá þátttakendum með ýmsa fylgisjúkdóma og fyrri bólusetningar/sýkingarstöðu (tafla 1).ráðinn víðsvegar um Bretland á milli 24. janúar og 14. mars 202214. Meirihluti (90,9%) fingrasýna var rétt fengin og send til rannsóknarstofu innan 24 klukkustunda frá söfnun.Í sumum tilfellum bárust sýni innan 48 klukkustunda frá blóðtöku, en ekkert þessara sýna stóðst gæðaeftirlit og hafði ekki áhrif á heildarmælingar á T-frumum eða mótefnum (viðbótarmynd 5).Þrátt fyrir að munur hafi verið á stærð SARS-CoV-2-sértæku IFN-γ+ T-frumusvörunar mæld í viðkomandi háræða- og bláæðablóðsýnum hjá sumum einstaklingum, var enginn marktækur munur á heildina litið (P = 0,88; viðbótarmynd 6). ).).
SARS-CoV-2-sértæk IFN-γ+ T frumusvörun var marktækt aukin hjá bólusettum einstaklingum sem einnig tilkynntu um fyrri sýkingu (P = 0,0001), en ekki marktækt hærri en hjá áður sýktum óbólusettum gjafa einstaklingum (P = 0,19, mynd. 3a).).IgG svörun gegn toppglýkópróteini (RBD, S1, S2) var marktækt hærri hjá bólusettum gjöfum en óbólusettum gjöfum, óháð fyrri sýkingarstöðu (mynd 3b-d).Athyglisvert er að meðal N-bundið IgG svörun var hæst hjá áður sýktum óbólusettum þátttakendum samanborið við bólusetta þátttakendur, þó að þetta hafi ekki náð marktæku (Mynd 3e).Meðal óbólusettra og ósýktra gjafa sem lýstu sjálfum yfir voru 15 af 37 (40,5%) þátttakendum jákvæðir fyrir N-tengt IgG, yfir áður settum viðmiðunarmörkum 2,0 BAU/mL14;þessir 15 þátttakendur Tólf af þessum sjúklingum reyndust jákvæðir fyrir IFN-γ+ T frumusvörun yfir áður settum viðmiðunarmörkum 22,7 pg/mL IFN-γ14.Þess vegna er líklegt að þessir þátttakendur hafi áður verið sýktir af SARS-CoV-2 og hafi ekki verið prófaðir fyrir COVID-19 vegna persónulegs vals, skorts á PCR og/eða hliðflæðisbúnaði eða voru einkennalausir.Þó að marktæk fylgni hafi verið á milli T-frumuviðbragða við IFN-γ+ og N-tengds IgG gildi hjá óbólusettum gjöfum (P = 0,0044; viðbótarmynd, minnkaði N-tengd IgG svörun hraðar en N-tengd IgG svörun, en IFN-γ + T-frumu svörun hélst óháð bólusetningarstöðu, þó að fjöldi gjafa 50 vikum eftir ögrun hafi verið lítill (viðbótarmynd 8). Bólusetningargerð var almennt lítið frábrugðin IgG svörun sem var sértæk fyrir SARS-CoV-2, T frumur og RBD-tengdar, þó þátttakendur sem fengu tvo skammta af BNT162b2 á eftir mRNA1273 endurbólusetningu sýndu marktækt hærra magn af IFN-γ + T frumum voru næmari fyrir SARS-CoV-2 en þeir sem fengu tvo skammta af ChAdOx1 og BNT162b2 (viðbótaruppbót) Mynd 9) Að auki höfðu tilkynntar fylgisjúkdómar lítinn heildarmun á T-frumuviðbrögðum sem komu fram samanborið við heilbrigða gjafa (viðbótarmynd 10).
SARS-CoV-2-sértæk IFN-γ+ T-frumuviðbrögð voru mæld með háræðaprófi í heilblóði og voru byggð á bólusetningum þátttakenda og fyrri SARS-CoV-2 sýkingarstöðu (staðfest með PCR og/eða hliðflæðisprófi).'Vac + /Inf +' n = 42 (grænt), 'Vac + /Inf-' n = 158 (blátt), 'Vac-/Inf +' n = 33 (gult), 'Vac- /Inf-' n = 37 (grátt).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac- /Inf-) P = 0,014 .SARS-CoV-2 sértæk IgG bindiviðbrögð við toppviðtakabindingarsvæðinu ("RBD") (b; ****P < 0,0001, ns: ekki marktæk), toppundireining 1 ("S1") (c; * * **P < 0,0001, ns: ekki marktækt), toppundireining 2 (“S2″) (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) og kjarnakapsíð („N“) (e; ****P < 0,0001, ns ekki marktækt) voru mældar með heilblóðsgreiningu í bláæðum og byggðar á bólusetningum þátttakenda og fyrri SARS-CoV-2 (staðfest með PCR og/eða hliðflæðisgreiningu) Sýkingum var skipt niður með stöðu.'Vac + /Inf +' n = 46 (grænt), 'Vac + /Inf-' n = 182 (blátt), 'Vac-/Inf +' n = 34 (gult), 'Vac-/Inf-' n = 37 (grátt).Samanburður var gerður með Kruskal-Wallis prófinu, leiðrétt fyrir margvíslegan samanburð með Dunn prófinu.Gögnin eru sýnd sem töflur (miðlína við miðgildi, efri mörk við 75. hundraðshluta, neðri mörk við 25. hundraðshluti) með hársvörð við lágmarks- og hámarksgildi.Hver punktur táknar gjafa.Hrágögn eru veitt í formi hrágagnaskráa.
Eins og áður voru þátttakendur beðnir um að tilkynna jákvæðar niðurstöður um PCR og/eða hliðar blóðflæði vegna COVID-19;Samkvæmt bresku heilbrigðisstofnuninni var talið að þátttakendur hefðu verið sýktir af Omicron kransæðaveirunni (B.1.1.529) þegar jákvæða veiruafbrigðið var prófað, þar sem það var ríkjandi afbrigði í Bretlandi á rannsóknartímabilinu.Meðal 299 metanlegra gjafa sáum við sýkingartíðni upp á 8,0% (24/299) innan þriggja mánaða frá háræðagjöf, þar af sjö voru ekki bólusett.Hlutfall fylgisjúkdóma meðal allra þátttakenda var lægra hjá þeim sem reyndust jákvæðir fyrir COVID-19 (10,7%) en þeim sem reyndust neikvæðir fyrir COVID-19 (24,4%, tafla 1), sem kann að stafa af því að þátttakendur með ákveðna sjúkdómar eru varkárari og vernda gegn hugsanlegum afleiðingum eins og sykursýki og krabbameini.Eins og sést í bláæðablóðhópi, SARS-CoV-2-sértækar interferon-γ (IFN-γ)-jákvæðar T-frumur mældar í háræðablóðsýnum frá einstaklingum sem tilkynntu um jákvætt greiningarpróf fyrir COVID-19.Svarstærð var marktækt lægri en hjá ósýktum gjöfum (P = 0,034; mynd 4a) vegna tiltölulega lélegrar framköllunar T-frumusvars með bólusetningu og/eða fyrri sýkingu (viðbótarmynd 11).Á sama hátt voru hvorki RBD-, S1-, S2-bindandi IgG svör (myndir 4b-d) né RBD-, S1 hlutleysandi mótefnasvörun sértæk fyrir villigerð eða delta SARS-CoV-2 (B. 1.617).(Viðbótarmynd 12).Hægt er að bera kennsl á einstaklinga í verulegri hættu á sýkingu.Öfugt við bláæðahópinn, greinir N-tengd IgG-svörun heldur ekki á hættu á COVID-19 (Mynd 4e), sem bendir til þess að Omicron afbrigðið (B.1.1.529) auki ónæmisundanskot hjá áður sýktum einstaklingum, eins og nýlega var lýst 21. Aftur á móti var styrkur SARS-CoV-2-sértæku IFN-γ T frumusvarsins aftur mikilvægasta breytan við að ákvarða einstakar líkur á að prófa jákvætt fyrir COVID-19 (Mynd 4f).Í heildina voru þátttakendur með SARS-CoV-2-sértæka háræða T-frumu svörun ≤23,7 pg/ml IFN-γ 14,9% hættu á sýkingu eftir þrjá mánuði samanborið við svörun >141,6 pg/ml.ml IFN.-γ var með 4,4% smithættu (tafla 2).
IFN-γ+ T frumu svörun sértæk fyrir SARS-CoV-2 (a; *P = 0,034) og SARS-CoV-2 sértækt IgG-miðað viðtakabindandi lén („RBD“) (b), toppundireining 1 (' S1′) (c), toppundireining 2 ('S2') (d) og núkleókapsíðbindingahvörf ('N') (e).Þátttakendur greindust jákvæðir fyrir COVID-19 próf (PCR og/eða hliðar blóðflæðispróf), allar sýkingar komu fram innan 3 mánaða frá blóðsýni.Samanburður var gerður með því að nota tvíhliða Mann-Whitney próf.Gögnin eru sýnd sem töflur (miðlína við miðgildi, efri mörk við 75. hundraðshlutamörk, neðri mörk við 25. hundraðshlutamörk) með hársvörð við lágmarks- og hámarksgildi.Hver punktur táknar gjafa.ns er ekki mikilvægt.Hitakortið f sýnir Spearman's rank fylgni milli breyta fyrir tilgreint gagnasafn.Samanburður sem var ekki tölfræðilega marktækur var útilokaður úr fylkinu og merktur með auðum reitum.Hrágögn eru veitt í formi hrágagnaskráa.
Þegar við förum yfir í næsta áfanga COVID-19 heimsfaraldursins mun áherslan færast frá forvörnum yfir í einstaklingsbundna áhættustýringu og að bera kennsl á viðkvæma þjóðfélagsþegna.Að koma á fylgni ónæmis gegn COVID-19 er mikilvægt til að bera kennsl á og meðhöndla þessa áhættuhópa á skilvirkan hátt.Það eru nú vaxandi vísbendingar um að T-frumuónæmi verndar gegn SARS-CoV-2 sýkingu og takmarkar alvarleika COVID-1910.Gögnin sem kynnt eru hér sýna fram á að samanlagður styrkur SARS-CoV-2-sértækra IFN-γ+ T-frumuviðbragða gegn topp-, himnu- og kjarnakapsíð byggingarpróteinum veitir meiri vernd gegn COVID-19 en mótefnabindingu.19 stuðlar að eða hlutleysir svörun. .og ber að hafa í huga við mat á einstaklings- og/eða hjarðónæmi.RNA vírusar eins og SARS-CoV-2 eða inflúensu A veira (IAV) forðast sermisfræðilega hlutleysingu með því að þróa hratt útsettar B-frumur epitopes á yfirborðsmótefnavaka sem þekkjast af mótefnum.Hlífðarónæmissvörunin sem T-frumurnar veita geta endurspeglað miðun á epitopes frá meira varðveittum svæðum veirupróteina sem geta ekki sloppið fljótt við ónæmissvörun.T-frumumiðluð vörn gegn nýjum SARS-CoV-2 afbrigðum er svipuð heterosubtypic vernd sem miðlað er af T-frumumiðun á varðveittum innri próteinum sem sjást í IAV22,23 undirgerðum.
Þrátt fyrir gríðarlega möguleika á að mæla ónæmissvörun frumna við COVID-19, hefur tiltölulega lítill gaumur verið gefinn að þróun nákvæmra, afkastamikilla, staðlaðra T-frumugreininga.Hefðbundin margbreytileiki og kostnaður sem fylgir því að mæla svörun T-frumna útilokar nákvæma ákvörðun á ónæmi T-frumna þegar skimað er fyrir ónæmi fyrir stórum hópi.Þó að nokkrar peptíðaörvunarprófanir í heilblóði í atvinnuskyni hafi nýlega orðið fáanlegar, þurfa allir sem stendur blóðlækni til að fá blóð, sem takmarkar framboð og mælikvarða.Háræðablóðkerfi eru mikið notuð til að ákvarða algengi SARS-CoV-2 mótefna í þýði.Við aðlöguðum háræðablóðpróf til að framkvæma heilblóðspeptíðörvunarpróf til að meta hvarfgirni T-frumna við SARS-CoV-2 byggingarprótein og SARS-CoV-2 sértæk mótefnasvörun.Reyndar er samsett mæling á SARS-CoV-2 sértækum mótefnum og T-frumum í sama háræðablóðsýni mjög aðlaðandi: (i) dregur úr þörfinni fyrir margar blóðprufur á hvern þátttakanda, (ii) bætir reynslu og skilning þátttakenda;(iii) bæta flutninga og draga úr tvíverknaði, (iv) draga úr umhverfisáhrifum þar sem minna þarf af rekstrarvörum á rannsóknarstofu og afhendingu sýna.Þrátt fyrir að heildarviðbrögð IFN-γ hafi verið svipuð milli pöruðu bláæða- og háræðablóðsýna, kom fram að hún var lægri í háræðablóðhópi þátttakenda (mynd 4a) samanborið við bláæðablóðhópinn (mynd 2a).IFN-γ gildi Það eru nokkrar skýringar á þessari niðurstöðu, þ.e., mikill fjöldi þátttakenda með fylgikvilla sem þarfnast ónæmisbælandi meðferðar var ráðinn inn í háræðablóðsýnishópinn (tafla 1) og lífvænleika og/eða virkni T-frumna sem fengust úr æðum. sýni geta verið lítil, sérstaklega að teknu tilliti til aðstæðna við langtímageymslu sýna fyrir peptíðörvun.
Núverandi víða fáanlegt COVID-19 bóluefni veitir bestu vörn gegn alvarlegum sjúkdómum fyrir flesta viðtakendur innan 6 mánaða frá bólusetningu8.Það er uppörvandi að þrátt fyrir slæma sermisfræðilega hlutleysingu af völdum bóluefnis á SARS-CoV-26,7 afbrigðum, hélst T-frumuviðbrögð sem framkölluð voru með bólusetningu gegn villigerð SARS-CoV-2 mjög viðbrögð, þar sem 25 önnur komu fram.Gögnin sem við kynnum hér sýna fram á mikilvægi víðtækara mats á ónæmingargetu bóluefnis, þar sem lögð er áhersla á bóluefni með ófullnægjandi T-frumuónæmi til að koma í veg fyrir skyndilega sýkingu og viðvarandi flutning vírusins.Við sáum líka að margir óbólusettir einstaklingar sem voru ráðnir inn í háræðahópinn höfðu marktæk svörun á SARS-CoV-2 sértækum T-frumum (og N-bindandi IgG) óháð fyrri bólusetningu, sem er líklega vegna fyrri sýkingar.Í stað þess að bólusetja viðeigandi einstaklinga ætti að meta hættu þeirra á sýkingu út frá núverandi bólusetningarstöðu þeirra og upplýstu vali sem teknar eru.
Takmarkanir þessarar rannsóknar fela í sér fullvissu um að þátttakendur hafi tilkynnt sjálfir um sýkingu með SARS-CoV-2 eftir blóðsöfnun til að ákvarða mikilvægi ónæmis;sumir þátttakendur geta verið með einkennalausa sýkingu og geta ekki farið í PCR og/eða hliðflæðispróf fyrir COVID-19.Í gagnasafninu okkar vantaði einnig upplýsingar um lyf þátttakenda þegar blóðsýni voru tekin.Þar að auki, í ljósi þess að allir þátttakendur okkar tilkynntu aðeins um væg/í meðallagi einkenni eða engin einkenni, var ekki hægt að bera kennsl á ónæmissvörun úr gagnasettinu okkar sem spáði aukinni hættu á alvarlegum veikindum og sjúkrahúsvist vegna COVID-19.Hins vegar hefur tilvist CD8+ T frumuviðbragða gegn kjarnakapsíðsértækum epitopum nýlega verið tengd við vernd gegn alvarlegu COVID-1926.Að auki mældi greiningin sem notuð er hér ekki svörun T-frumna við sérstökum, snemma tjáðum SARS-CoV-2 próteinum sem ekki eru uppbygging, sem nýlega hefur verið sýnt fram á að helst safnast upp hjá seronekvæðum heilbrigðisstarfsmönnum sem hafa verið í sambandi við sýkta sjúklinga.Miðað við þessa vinnu, miðað við algengi smits í samfélaginu við ráðningu og miklar líkur á snertisýkingu í þýðinu, virðist fjöldi SARS-CoV-2 sértækra T-frumna sem finnast í prófunum okkar einnig vera fær um að hreinsa út.undirklínískar sýkingar í árgöngum okkar.Að lokum mældum við ekki interleukin 2 framleiðslu T-frumna vegna þess að fyrri vinna okkar sýndi lélega auðkenningu á SARS-CoV-214-sértæk T-frumuviðbrögð, þó að IL-2-sértæk svör gætu bent til fyrirliggjandi krossviðbragða.frumur sem tengjast vörn gegn SARS-CoV-211 sýkingu.
Samanlagt benda þessi gögn á grundvallarþörfina fyrir langtíma langtímarannsóknir sem fella SARS-CoV-2-sértæk T-frumuviðbrögð inn í mælikvarða á ónæmi á íbúaskala.Þessi viðleitni gæti verið aðstoðuð með þróun nýrrar háræðablóðprófs sem mælir svörun T-frumna.
Rannsóknarverkefnið fékk þátttakendur frá febrúar 2021 til mars 2022. Hópur heilbrigðra gjafa (n = 148) sem gáfu bláæðablóðsýni samanstóð fyrst og fremst af starfsfólki háskólans og nemendum sem tóku þátt í COVID-19 skimunarþjónustu Cardiff háskólans eða starfsfólki í grunnskóla í Cardiff.Allir þátttakendur voru að öðru leyti heilbrigðir og sögðust ekki hafa tekið nein ónæmisbælandi lyf (sjá töflu 1 fyrir eiginleika).Hópur þátttakenda sem gáfu háræðablóðsýni voru allir frjálsir gjafar (á aldrinum 18+) víðsvegar um Bretland.Á tímabilinu 24. janúar til 14. mars 2022 voru 342 þátttakendur skráðir í rannsóknina, þar af sendu 299 blóðsýni á rannsóknarstofuna.Margir þátttakendur voru áfram óbólusettir og/eða greindu frá alvarlegum fylgisjúkdómum, þar á meðal sjálfsofnæmissjúkdómum og krabbameini (sjá töflu 1 fyrir einkenni).Þessi rannsókn fékk siðferðilegt samþykki frá Newcastle og North Tyneside 2 rannsóknarsiðanefndinni (ID IRAS: 294246) og siðanefnd læknadeildar Cardiff háskólans (SREC tilvísun: SMREC 21/01).Allir þátttakendur gáfu skriflegt upplýst samþykki fyrir skráningu.Þátttakendur fengu engar bætur fyrir þátttöku í þessari rannsókn.
Blóðsýni úr bláæðum voru tekin með bláæðastungum í 6 eða 10 ml litíum- eða natríumheparín tæmistæma (BD).Háræðablóðsýni voru tekin með fingurskífu og síðan safnað í heparín örílát (BD).Að minnsta kosti 400 µl af blóði þarf;sýni sem er lægra en þessa upphæð verður hafnað.Aðrar ástæður fyrir höfnun sýna voru ma stórfelld storknun og/eða blóðleysi og misbrestur á að safna seigfljótandi plasma til greiningar (aukamynd 5).Alls voru 299 háræðablóðsýni tiltæk til að meta mótefnasvörun, þar af 270 sýni til að meta svörun T-frumna.
SARS-CoV-2 sértæk T-frumuviðbrögð voru metin með COVID-19 Immuno-T prófinu (ImmunoServ Ltd) og framkvæmd eins og áður hefur verið lýst14.Í stuttu máli var einn 6 ml eða 10 ml natríumheparín (BD) bláæðasugur tekinn frá hverjum þátttakanda og unninn á rannsóknarstofunni innan 12 klukkustunda frá blóðsöfnun.Þrátt fyrir að flest sýni hafi verið unnin innan 24 klst., var einu 400–600 μl háræðablóði af heparínblæstri (BD) safnað innan 48 klst. frá fingurstikusýni.Bláæða- og/eða háræðablóðsýni voru örvuð með aðskildum peptíðsöfnum sem eru sértækar fyrir SARS-CoV-2 (villt afbrigði) eins og áður hefur verið lýst14.Þetta peptíðsafn inniheldur 420 15-mera raðir með 11 amínósýrum sem skarast sem spanna allt topppróteinið (S1 og S2) (S; NCBI prótein: QHD43416 1), núkleókapsíð fosfóprótein (NP; NCBI prótein: QHD43423 2) og himnuhimnu (Mglýkóprótein) ; NCBI prótein: QHD43419 1) kóðaraðir (vísað til sem „S-/NP-/M-samsett peptíðsafn“).Öll peptíð voru hreinsuð í >70%, leyst upp í dauðhreinsuðu vatni og notuð í lokastyrk 0,5 μg/ml á peptíð.Sýni voru ræktuð við 37°C í 20-24 klst.Glösin voru síðan skilgreind við 5000×g í 3 mínútur og ~150 µl af plasma var safnað ofan af hverju blóðsýni.Geymið plasmasýni við -20°C í allt að einn mánuð áður en frumu-/mótefnagreiningarpróf eru keyrð.
IFN-γ var mælt með því að nota IFN-γ ELISA MAX Deluxe settið (BioLegend, vörunúmer 430116) og framkvæmt samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.Strax eftir að stöðvunarlausn (2N H2SO4) var bætt við var örplatan lesin við 450 nm með BioLegend Mini ELISA plötulesara.IFN-γ var magnmælt með staðlaðri ferilútreikningi með því að nota GraphPad Prism.Gildi undir neðri greiningarmörkum greiningarprófsins voru skráð sem 7,8 pg/ml, gildi yfir efri greiningarmörkum greiningarprófsins voru skráð sem 1000 pg/ml.
And-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG mótefni voru mæld með Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex spjaldi (Bio-Rad, cat. no. 12014634) og merkt skv. leiðbeiningum framleiðanda.leiðbeiningar.Sýni sem tilkynntu um gildi yfir magnmörkum voru endurgreind í 1:1000 þynningu.Meðalflúrljómunarstyrkur perlnanna var mældur á Bio-Plex 200 tæki (Bio-Rad).Styrkur mótefna var reiknaður út með VIROTROL SARS-CoV-2 stakri samanburðargreiningu (Bio-Rad) og breytt í WHO/NIBSC 20/136 International Reference Standard Units (BAU/mL) með því að nota kvörðunarstuðla framleiðanda.
RBD og S1 undireiningarsértæk hlutleysandi mótefni gegn SARS-CoV-2 villigerð og delta (B.1.617) SARS-CoV-2 línum voru mældar með Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio -Rad , hlutanr. 12016897), samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.Mældu meðalflúrljómunarstyrkinn á Bio-Plex 200 (Bio-Rad) og reiknaðu prósentu hömluna (þ.e. hlutleysingu) með því að nota eftirfarandi formúlu:
Smitandi hlutleysandi mælingar fyrir SARS-CoV-2 voru framkvæmdar eins og áður hefur verið lýst28.Í stuttu máli voru 600 PFU af villigerð SARS-CoV-2 ræktuð með 3-faldri raðþynningu af plasma í tvíriti í 1 klukkustund við 37°C.Blöndunni var síðan bætt við VeroE6 frumur í 48 klukkustundir.Einlög voru fest með 4% paraformaldehýði, gegndræp með 0,5% NP-40 og ræktuð í 1 klst í blokkandi stuðpúða (PBS sem innihélt 0,1% tween og 3% undanrennu).Aðalmótefni (anti-nucleocapsíð 1C7, Stratech) var bætt við blokkandi stuðpúða í 1 klukkustund við stofuhita.Eftir þvott var öðru mótefni (and-músa IgG-HRP, Pierce) bætt við blokkandi stuðpúða í 1 klukkustund.Einlög voru þvegin, þróuð með Sigmafast OPD og lesin á Clariostar Omega plötulesara.Brunnar án vírusa, án vírusa en án mótefna, og eðlileg sermi sem sýndu millivirkni voru með í hverri tilraun sem viðmið.
Tölfræðileg greining var framkvæmd í GraphPad Prism (útgáfa 9.4.1).Eðlileiki gagnasafnsins var prófaður með Shapiro-Wilk prófinu.Notuð voru óviðmiðunarviðmið fyrir allan samanburð.Mann-Whitney prófið var notað fyrir ópöruð sýni.Öll prófin voru tvíhliða með nafnmarktækniþröskuldi P ≤ 0,05.
Upphafleg könnunargreining á gagnasafninu var gerð í R (útgáfa 4.0.3).Þetta felur í sér þróun Spearman's univariate rank fylgnifylkis, þar sem fylgni milli tveggja breyta er táknuð með stærð og lit ferninganna.Tölfræðileg marktækni milli tengsla var reiknuð út með Spearman's rho, þar sem gildi ≤0,05 voru talin marktæk.Samanburður sem var ekki tölfræðilega marktækur var útilokaður úr fylkinu og merktur með auðum reitum.P-gildi voru leiðrétt fyrir margvíslegan samanburð með því að nota Holms leiðréttingu.Tvöfaldur logistic aðhvarfslíkan var notað til að líkja eftir áhrifum breyta í gagnapakkanum á jákvæða svörun við COVID-19.IFN-γ T frumu svörun og and-RBD/S1/S2/N IgG titer stigum var breytt í þætti, þar sem hverjum einstaklingi var úthlutað í viðeigandi kvartíl fyrir hvert stig.Eftir það var frumrannsóknarlíkan þróað með glm fallinu í tölfræðipakkanum (V4.0.3).Líkindahlutföllin úr þessu upprunalega líkani voru dregin út úr stuðlum líkansins með því að nota 'odds_plot' fallið í OddsPlotty pakkanum (V1.0.2).Við þróun krossmatslíkansins notuðum við „bestglm“ aðgerðina úr bestglm pakkanum (V0.37.3) til að takmarka hlutdrægni notenda og tryggja að hægt sé að velja besta undirmengi spámanna.Aðferðin sem var valin var „tæmandi“ og upplýsingaviðmiðið sem notað var til að meta líkanpassa var AIC.Sama verkflæði og lýst er hér að ofan var notað til að fá líkindahlutfallið.
Nánari upplýsingar um hönnun náms er að finna í Nature study abstract sem er tengt við þessa grein.
Bréf og beiðnir um efni ætti að beina til Dr. Martin Scarr eða prófessor Andrew Godkin.Þessi grein veitir upprunalegu gögnin.
R kóðinn sem notaður er til að búa til tölfræðileg líkön er aðgengilegur almenningi án beiðni29.Upplýsingar um endurprentun og leyfi má finna á www.nature.com/reprints.
Munro, APS o.fl.Öryggi og ónæmingargeta sjö COVID-19 bóluefna sem þriðji skammtur (örvunarskammtur) eftir tvo skammta af ChAdOx1 nCov-19 eða BNT162b2 (COV-BOOST) í Bretlandi: 2. stigs, blinduð, fjölsetra, slembiraðað, stýrð rannsókn.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV o.fl.Ónæmingargeta, öryggi og hvarfvirkni misleitrar frumbólusetningar gegn COVID-19 (Com-COV2) með því að nota mRNA, veiruferjur og prótein ónæmisglæðisbóluefni í Bretlandi: 2. stigs, einblind, slembiröðuð rannsókn, óæðri próf.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB o.fl.Virkni COVID-19 bóluefna hjá ónæmisbældum sjúklingum: Kerfisbundin endurskoðun og meta-greining.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. o.fl.Minnkuð hlutleysing SARS-CoV-2 míkron afbrigði B.1.1.529 með sermi eftir bólusetningu.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y og Baliser RD Byltingarkennd sýking í SARS-CoV-2 bólusettum einstaklingum: mæling, orsakir og afleiðingar.Þjóðarprestur ónæmisfræði.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG o.fl.Veikt ónæmissvörun í húmor við BNT162b2 Covid-19 bóluefni í 6 mánuði.N. Eng.J. Læknisfræði.385, e84 (2021).
Carreño, JM o.fl.Virkni bata- og bóluefnissermis gegn SARS-CoV-2 Omicron.Náttúra 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. o.fl.Lengd verndar Qatari mRNA bóluefnisins gegn SARS-CoV-2 Omicron BA.1 og BA.2 undirafbrigðum.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ o.fl.Minni B frumutíðni minnkar með byltingarkennd sýkingu af COVID-19 delta bóluefni.Sameindalæknisfræði EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. o.fl.Krosshvarfandi T-minnisfrumur tengjast því að vernda COVID-19 tengiliði gegn SARS-CoV-2 sýkingu.Þjóðarsveit.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH o.fl.Sérstök SARS CoV-2 omicron-hvarfandi T-frumu- og B-frumuviðbrögð hjá COVID-19 bóluefnisþegum.vísindin.Ónæmisfræði.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu o.fl.Erfðar SARS-CoV-2 sértækar T frumur þekkja Omicron afbrigði.Þjóðarlækningar.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ o.fl.Mæling á SARS-CoV-2 sértækum T-frumum úr heilblóði sýnir einkennalausa sýkingu og ónæmingargetu bóluefnis hjá heilbrigðum einstaklingum og sjúklingum með krabbamein í föstu líffæri Ónæmisfræði https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT o.fl.Hröð mæling á SARS-CoV-2 topp T-frumum í heilblóði bólusettra og náttúrulega sýktra einstaklinga.J. Klínísk.fjárfesta.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU o.fl.COVID-19 bóluefnaviðbrögð hjá MS-sjúklingum.setja upp.Taugafrumur.91, 89–100 (2022).
Bradley RE o.fl.Viðvarandi COVID-19 sýking með Wiskott-Aldrich heilkenni hvarf eftir meðferðarbólusetningu: tilviksskýrsla.J. Klínísk.Ónæmisfræði.42, 32–35 (2022).